| 商品名称 |
Human Proinsulin (PI) ELISA Kit |
| 商品编号 |
FS10004 |
| 中文名 |
人胰岛素原(PI)ELISA检测试剂盒 |
| 检测范围 |
12.5-800pg/mL |
| 产品规格 |
96T |
| 样本类型 |
血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清 和 其他生物液体 |
| 保存条件 |
2-8℃ |
| 产品用途 |
科研实验 |
| 检测原理 |
双抗体夹心法 |
| 操作步骤 |
操作步骤:
1. 从室温平衡10分钟后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封
放回4℃。
2. 加样:分别将样本或不同浓度标准品按照100μL每孔加入相应孔中,空
白孔加入100μL通用稀释液。盖上封板膜后37℃温育60分钟。(建议:
将待测样本用通用稀释液最低稀释1倍后再加入酶标板内测试。从而减
少基质效应对测试结果的影响,最后计算样本浓度时需乘以对应的稀释
倍数。所有的待测样本和标准品在检测中建议设立复孔)。
3. 加生物素化检抗:取出酶标板,弃去液体,不用洗涤。每孔直接加入
100μL生物素化检抗工作液,盖上封板膜后37℃温育60分钟。
4. 洗板:弃去液体,每孔加入300μL1x洗涤液,静置1分钟,甩去洗涤液,
吸水纸上拍干,如此重复洗板3次(也可用洗板机洗板)。
5. 加酶结合物工作液:每孔加入100μL酶结合物工作液,盖上封板膜后
37℃温育30分钟。
6. 洗板:弃去液体按步骤4洗涤方法,洗板5次。
7. 加底物:每孔加入90μL底物(TMB),盖上封板膜,37℃避光温育15分钟。
8. 加终止液:取出酶标板,每孔直接加入50μL终止液,立即在450nm波长
处测定各孔的OD值。 |
【别称】
C4
【C4 简介】
补体蛋白4(C4),是一种参与错综复杂的补体系统的蛋白质。它在免疫、耐受和自身免疫中与其他众多成分一起发挥着一些关键功能。此外,它是连接由抗体-抗原(Ab-Ag)复合物煽动的整个系统的识别途径和先天免疫反应的其他效应蛋白的一个关键因素。例如,补体系统功能失调的严重程度可以导致致命的疾病和感染。然而,C4蛋白来源于一个简单的双焦点等位基因模型,即C4A-C4B基因, 这个基因模型最初是在Chido/Rodgers血型系统的背景下定义的,目前正在调查其在精神分裂症风险和发展中的可能作用。
【特异性】
可检测样本中小鼠的C4,且与其类似物无明显交叉反应。
【典型数据及参考曲线】
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(ug/mL) | 10 | 5 | 2.5 | 1.25 | 0.625 | 0.312 | 0.156 | 0
OD值 | 2.22 | 1.45 | 0.78 | 0.45 | 0.29 | 0.2 | 0.17 | 0.07
校正OD值 | 2.15 | 1.38 | 0.71 | 0.38 | 0.22 | 0.13 | 0.1 | -
【重复性】
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
【回收率】
在选取的健康小鼠血清、血浆中加入3个不同浓度水平的小鼠C4,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率
血清(n=8) | 84-101 | 96
血浆(n=8) | 93-105 | 102
【线性稀释】
分别在选取的4份健康小鼠血清、血浆中加入高浓度小鼠C4,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 血清 | 血浆
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-96
1:2 | 平均回收率(%) | 91 | 93
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108
1:4 | 平均回收率(%) | 94 | 98
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。