| 商品名称 |
Human Osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit |
| 商品编号 |
FS10009 |
| 中文名 |
人骨保护素(OPG)ELISA检测试剂盒 |
| 检测范围 |
0.15-10ng/mL |
| 产品规格 |
96T |
| 样本类型 |
血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清 和 其他生物液体 |
| 保存条件 |
2-8℃ |
| 产品用途 |
科研实验 |
| 检测原理 |
双抗体夹心法 |
| 操作步骤 |
操作步骤：
1. 从室温平衡10分钟后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封
放回4℃。
2. 加样：分别将样本或不同浓度标准品按照100μL每孔加入相应孔中，空
白孔加入100μL通用稀释液。盖上封板膜后37℃温育60分钟。（建议：
将待测样本用通用稀释液最低稀释1倍后再加入酶标板内测试。从而减
少基质效应对测试结果的影响，最后计算样本浓度时需乘以对应的稀释
倍数。所有的待测样本和标准品在检测中建议设立复孔）。
3. 加生物素化检抗：取出酶标板，弃去液体，不用洗涤。每孔直接加入
100μL生物素化检抗工作液，盖上封板膜后37℃温育60分钟。
4. 洗板：弃去液体，每孔加入300μL1x洗涤液，静置1分钟，甩去洗涤液，
吸水纸上拍干，如此重复洗板3次（也可用洗板机洗板）。
5. 加酶结合物工作液：每孔加入100μL酶结合物工作液，盖上封板膜后
37℃温育30分钟。
6. 洗板：弃去液体按步骤4洗涤方法，洗板5次。
7. 加底物：每孔加入90μL底物(TMB)，盖上封板膜，37℃避光温育15分钟。
8. 加终止液：取出酶标板，每孔直接加入50μL终止液，立即在450nm波长
处测定各孔的OD值。 |
【别称】
HRNT1; O-GLCNAC; UDP-N-acetylglucosamine--peptide N-acetylglucosaminyltransferase 110 kDa subunit; O-GlcNAc transferase subunit p110
【OGT 简介】
OGlcNAc 糖基转移酶(OGT）是一种酶，由 OGT 基因编码。OGT 催化通过 O-糖苷连接到丝氨酸或苏氨酸和 S-糖苷连接到核细胞质蛋白的半胱氨酸残 基，添加单一的 N-乙酰葡萄糖胺。由于磷酸化和 O-GlcNAcylation 都在竞 争类似的丝氨酸或苏氨酸残基，这两个过程可能在争夺位点，或者它们可能 通过立体或静电效应改变附近位点的底物特异性。已发现该基因有两个转录 变体，分别编码细胞质和线粒体的异构体。
【特异性】
可检测样本中人的OGT，且与其类似物无明显交叉反应。
【典型数据及参考曲线】
由于实验操作条件的不同（ 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度（ng/mL) | 100 | 50 | 25 | 12.5 | 6.25 | 3.12 | 1.56 | 0
OD值 | 2.22 | 1.56 | 0.92 | 0.63 | 0.42 | 0.25 | 0.18 | 0.08
校正OD值 | 2.14 | 1.48 | 0.94 | 0.55 | 0.34 | 0.17 | 0.1 | -
【重复性】
板内变异系数小于10%，板间变异系数小于10%
【回收率】
在选取的健康人组织匀浆、细胞裂解液、中加入3个不同浓度水平的人OGT，计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率
组织匀浆(n=8) | 84-103 | 98
细胞裂解液(n=8) | 96-108 | 105
【线性稀释】
分别在选取的4份健康人组织匀浆、细胞裂解液、中加入高浓度人OGT，在标准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。
稀释比例 | 回收率（%） | 组织匀浆 | 细胞裂解液
1：2 | 范围（%） | 88-96 | 90-110
1：2 | 平均回收率（%） | 93 | 96
1：4 | 范围（%） | 87-108 | 105-115
1：4 | 平均回收率（%） | 98 | 108
注：ELISA试剂盒检测范围等数据，因检测样本 的不同而调整，实际数据以随货说明书为准。
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