| 商品名称 |
Mouse Epidermal Growth Factor (EGF) ELISA Kit |
| 商品编号 |
FS10010 |
| 中文名 |
小鼠表皮生长因子(EGF)ELISA检测试剂盒 |
| 检测范围 |
15.62-1000pg/mL |
| 产品规格 |
96T |
| 样本类型 |
血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清 和 其他生物液体 |
| 保存条件 |
2-8℃ |
| 产品用途 |
科研实验 |
| 检测原理 |
双抗体夹心法 |
| 操作步骤 |
操作步骤:
1. 从室温平衡10分钟后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封
放回4℃。
2. 加样:分别将样本或不同浓度标准品按照100μL每孔加入相应孔中,空
白孔加入100μL通用稀释液。盖上封板膜后37℃温育60分钟。(建议:
将待测样本用通用稀释液最低稀释1倍后再加入酶标板内测试。从而减
少基质效应对测试结果的影响,最后计算样本浓度时需乘以对应的稀释
倍数。所有的待测样本和标准品在检测中建议设立复孔)。
3. 加生物素化检抗:取出酶标板,弃去液体,不用洗涤。每孔直接加入
100μL生物素化检抗工作液,盖上封板膜后37℃温育60分钟。
4. 洗板:弃去液体,每孔加入300μL1x洗涤液,静置1分钟,甩去洗涤液,
吸水纸上拍干,如此重复洗板3次(也可用洗板机洗板)。
5. 加酶结合物工作液:每孔加入100μL酶结合物工作液,盖上封板膜后
37℃温育30分钟。
6. 洗板:弃去液体按步骤4洗涤方法,洗板5次。
7. 加底物:每孔加入90μL底物(TMB),盖上封板膜,37℃避光温育15分钟。
8. 加终止液:取出酶标板,每孔直接加入50μL终止液,立即在450nm波长
处测定各孔的OD值。 |
【别称】
URG; Beta-Urogastrone; Pro-epidermal growth factor
【EGF 简介】
表皮生长因子(EGF)是一种通过与其受体EGFR结合而刺激细胞生长和分化的蛋白质。人的EGF是6kDa,有53个氨基酸残基和三个分子内二硫键。EGF最初被描述为一种分泌肽,在许多人体组织中发现了它,包括颌下腺(submaxillary gland),和腮腺。最初,人的EGF被称为urogastrone。EGF通过与其同源受体结合,导致细胞增殖、分化和存活。唾液中的EGF似乎受到饮食中无机碘的调节,在维持口食道和胃组织的完整性方面也发挥着重要的生理作用。唾液中的EGF的生物学作用包括:治愈口腔和胃食道溃疡,抑制胃酸分泌,刺激DNA合成,以及保护粘膜免受胃酸、胆汁酸、胃蛋白酶和胰蛋白酶等腔内损伤性因素的影响,以及保护粘膜免受物理、化学和细菌制剂的影响。
【特异性】
可检测样本中人的EGF,且与其类似物无明显交叉反应。
【典型数据及参考曲线】
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度单位(pg/mL) | 250 | 125 | 62.5 | 31.25 | 15.62 | 7.81 | 3.9 | 0
OD值 | 2.37 | 1.58 | 1.01 | 0.65 | 0.43 | 0.31 | 0.22 | 0.09
校正OD值 | 2.28 | 1.49 | 0.92 | 0.56 | 0.34 | 0.22 | 0.13 | -
【重复性】
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
【回收率】
在选取的健康人血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的人EGF,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率
血清(n=8) | 84-101 | 95
血浆(n=8) | 92-105 | 102
细胞培养上清(n=8) | 96-108 | 105
【线性稀释】
分别在选取的4份健康人血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度人EGF,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 血清 | 血浆 | 细胞培养上清
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-96 | 90-110
1:2 | 平均回收率(%) | 91 | 93 | 96
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 | 105-115
1:4 | 平均回收率(%) | 94 | 98 | 108
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。